公猪精液的新评定标准

　　1、前 言

　　猪精液采集后，首先要评定公猪精液质量，然后才能对精液进行进一步处理，以获取高质量的精液。处理精液以前，选择能有效筛选精液的方法对提高猪场的繁殖性能是必要的。在最理想的情况下，在精液处理前对公猪的精液进行全面地评估，以鉴别出那些劣质精液。对储藏的精液，每天必须检查总活动精子数和评估精子的外形;这样，将可以确保用于人工授精的精液不被污染。因此，这篇文章的目的就是叙述公猪精液质量的评定方法和说明哪些公猪的精液可以进入试验室进行进一步处理。

　　2、密 度

　　一般在评定公猪精液的质量时应检测四个基本参数：精子密度、活力、外形和顶体完整性。其中，精子的密度和活力这两个基本参数常在精液处理前筛选精液。原因是测定这两个参数花费的时间最少，而且可以用它们来计算精液的稀释倍数。

　　测定精液的浓度或精子的总数不仅是评定精液质量的组成部分，更重要的是用来监控公猪健康状况和繁殖潜力;并且，它还是优化个体遗传潜力的主要考虑因素。正确的评定精液的质量不只是增加公猪每次射精量和提高公猪舍的使用效率的唯一因素。精液质量评定的目的是保证有足够数量有活力的精子用于人工授精。

　　3、精子的活力

　　精液的活力是精液评定的一个重要方面。最近的一个研究表明：当在采精后立即(少于24h)进行评定和输精时，使用精子活力低于62.5%，产仔数/产仔率将下降。然而，由于商用种公猪的精液很少会在这么短时间内使用，所以，一般精液都经过处理后才输送到母猪场使用。精液经过储存后，它的活力会下降。所以在评定种公猪精液时，活力最小值应大于60%。许多种公猪站制定了精子活力在70~80%之间的筛选标准。精液经过实验室处理后活力最小值应根据使用前计划储存时间和在这段储存时间内的预期活力下降而定。并且，种公猪站必须考虑养猪场精液储存条件和处理精液的能力比公猪站差这一点。考虑公猪站与母猪场之间精液输送的差异将有助于公猪站选择初活力的接受水平以确保输送精液的精子活力在60.0%以上。

　　通过显微镜从视觉上估计精子活力的方法应用最广泛。技能和经验对结果准确性有一定的影响。简而言之，在温热的载玻片上放置一小滴精液稀释液(所有的评估中精液的稀释率必须统一标准)，然后盖上盖玻片。样本稀释到用400倍的物镜足以观察全部精子细胞，总体的估计来自观察的精子群。这样，应首先对实验员进行培训。这种培训首先要求实验员对总体精子活力进行估计，然后实验员用显微镜计算在5个区域内10个单元格的精子总数和有活力的精子占总精子的百分数，以验证精子总活力。

　　4、外 形

　　精子的外形和顶体完整同样对精子的生存力有影响。就估计精液质量而言，评定精子外形比评定精子活力更能体现精液质量。这两个参数和精子活力在精液质量评定时都至关重要。它们一起决定精液的取舍。

　　运动的精子可能外形上不正常;但是，运动力低的精子可能受精。然而，没有顶体的精子不可能受精。用这三个参数标准评定精液质量就很可能低估了精液真正的受精能力和公猪精液质量。

　　正如精子的活力，精子的外形评定表明：在使用人工授精时，需要一个确定正常精子外形百分数提高母猪繁殖率。研究资料还表明：精子常规评定使用的是外形这个参数。如果是使用精液，那么正常形态精子百分数小于70%的精液应认为是劣质精液。由于正常形态精子百分数在储存期将减少，而且由于在公猪个体间差异较大。所以，当使用长期(>24h)储存的精液时;最初处理的精液的正常形态的精子百分数要达在70%以上。

　　在检查精子活力同时可以粗略地对精子外形进行评定。然而，理想的外形检测要使用显微镜，它能区分精子的各个部分。精确地评定精子的外形是通过分别计算正常精子头部、微滴和尾部数。吸取1-2滴精液按1：10与稀释剂混合，使用显微镜(400倍或1000倍)观察，外形百分数可以直接计算出来。如果精液不可能立即被检测(<30分钟)，应先用0.5-1mL生理盐水固定或保存在载玻片上。除了保存样品，精子同时被固定。因此，更容易观察。可以观察湿的样本或者制成干的固定的标本再进行观察。头部、尾部和胞质畸形的精子计为不正常的精子。尽管有近端小滴(靠近头部)的精子对精液质量评定的影响较小。然而，当近端小滴迅速增加时，用产仔率和产仔数来衡量的繁殖力将逐渐降低。在采集的精液中末端微滴比近端小滴更易被发现，末端小滴的影响似乎与近端小滴一样。尽管一些资料认为公猪精液细胞质微滴的影响是有限的。

　　5、顶体完整性

　　顶体膜覆盖精子头部的三分之二，它含有穿透卵母细胞所必需的酶。顶体完整性的评定很费时,需要比较先进的显微镜，并且要有熟练地操作技能。一些研究表明：顶体完整性比精子的活力在评定精子质量方面更具有代表性。顶体完整性检查与精子外形检查的方法一样。然而，在检测单个精子细胞时应该先把载玻片放在显微镜下，然后观察精子顶体层的差别。顶体完整率小于51%的精液认定为劣质的精液，即使精液的受精率可能是处于同一水平。顶体的完整性评定使用与活力和形态学评定一样的原理。当精液被长期保存时，正常顶体百分数小于51%精液的受胎率可能很低。活力，外形，或顶体完整性的评定并不能完全估计繁殖力，但是它却是精子生存能力的基本表现。与公猪的射精能力预测产仔数和受胎率相比，以上所述的估计方法是通过消灭劣质的精液来影响受胎率和产仔数。