牙鲆人工繁殖

   （一）天然野生亲鱼人工采卵、授精   在刚开始进行牙鲆人工繁殖时，一般只能在产卵季节捕获天然野生亲鱼。由于单从外形上很难辨别雌、雄，所以在起网后发现有腹部膨大而柔软，生殖孔圆而呈红色，如稍挤压腹部会流出水样（卵子）者为雌性；如挤压腹部流出白色的精液为雄性，应立即进行人工授精。人工授精有干法授精和湿法授精两种。

    1.干法授精     先将雌亲鱼体表上的水和动液擦干，由一个人先将雌亲鱼两手抱起，其中右手托住头部，左手托住尾部，使头向下倾斜，使生殖孔对着盛卵容器（可用脸盆，但要先擦干净）；另一个人两手轻轻挤压腹部，使卵流入盛卵容器中。然后将雌鱼放回水中，再将准备好的雄鱼如上述方法挤出精液滴在卵群上。同时用羽毛或玻璃棒轻轻搅匀，然后放置5～10分钟，加入经砂滤的洁净海水，洗去多余的精液和污物(由于牙鲆卵为浮性卵，也可以用80目筛绢过滤洗去多余精液)，重复2～3次后除去下沉的死卵后放到孵化槽中孵化。

    2.湿法授精     先将洗净的容器放些砂滤洁净的海水，一人抱起雄鱼，另一人用手自后向前挤压雄鱼腹部，使精液流入盛有海水的容器中，然后将雌鱼的卵挤人盛有精液的容器中，用羽毛或玻璃棒搅匀后静置15～20分钟，经几次用洁净的同温海水洗去多余的精液和污物（用80目筛绢过滤）后，除去下沉的死卵，放到孵化槽中孵化。

(二)天然野生亲鱼注射激素人工采卵、授精     对在产卵期捕获腹部虽膨大，但卵尚未完全成熟或是虽处在产卵期，但尚看不出即将产卵的雌亲鱼，为防止性腺退化，可立即催产。可注射绒毛膜促性腺激素（HCG） 500～1000国际单位/千克体重或注射促黄体素释放激素类似物（LRH－A）10～200微克/千克体重，也可两种催产剂混合使用，也可用脑垂体2～3个/千克体重。对雄鱼可用HCG 100～250国际单位/千克体重。注射后一般l～2天即可进行采卵、人工授精。

    日本曾对处于产卵期腹部膨大的天然野生亲鱼和达到产卵期但未能看出能马上产卵的养成中的亲鱼注射激素西那浩林（垂体前叶制剂）或绒毛膜促性腺激素 500国际单位/千克体重，注射后l～2天可采卵、人工授精。

    1.注射方法     采取肌肉注射或腹腔注射。一般是在亲鱼胸鳍基部内、外侧进行肌肉注射或腹腔注射。雌鱼一般分2次注射。第1次注射全剂量的1／10，经8～12小时后再将其余部分注入，有的个体在第2次注射后几小时即可排卵。雄鱼可1次注射，一般是在雌鱼第2次注射时进行。注射激素后有的个体会自然排卵，但不一定能受精，一般需进行人工授精。

    2.人工授精注意事项     （1）人工授精操作时不宜在阳光直射下进行。     （2）对受精后卵子不宜过分震荡，以免发生卵膜破裂或出  现不正常的卵裂。     （3）在人工授精前最好先检查精子的活力（挤出1～2滴精液再滴上几滴清洁的海水，在显微镜下观察精子活动情况。另外检查卵的质量（好卵呈透明球状，彼此分离，浮性、无白浊卵径为0.9毫米左右）后再进行人工授精。

    由于野生亲鱼人工挤卵的方法往往受资源量、成熟度、时间、地点等多种因素限制，而且随机性很大。人工挤卵时从每尾亲鱼采的卵量少，能获得的优质卵也较少，同时其受精率也很低，一般多在0％～50％，所以很难有计划稳定进行苗种生产。现在多用以下方法来获得受精卵。

（三）经驯养的天然野生亲鱼和人工繁殖的苗种培养成的亲鱼进行自然产卵     当年从海上捕获的天然野生亲鱼，经驯养（全年都在陆上水地饲养，一般至少饲养1年以上），经过度夏和越冬能存活下来的一般都能在第二年春季的产卵季节自然产卵、受精。而由人工培育的苗种在陆上水池经2～3年培育性成熟后，在产卵季节也都能自然产卵、受精。而且通过控制水温和光照时间强化营养等措施，还可以使之有计划提早自然产卵，满足生产苗种要求。

    亲鱼的自然产卵是在亲鱼培育产卵池中进行，在产卵期间亲鱼培育产卵油采取溢流排水。亲鱼自然产出的卵受精后漂浮于水面，在溢流排水的同时，池水连同上浮的卵被旋流到池中央，由中央排水管导人集卵池（槽）。集卵槽内放置60～80目筛绢网制成的网箱，面积略小于集卵槽，高略高于集卵槽。根据亲鱼的产卵情况和集卵网箱中卵的数量，每天定时收集集卵网箱中的受精卵。需要注意的是：流入集卵网箱中的水流不宜过大，否则由于受精卵长时间在集卵网箱中被水冲击、搅动，易造成卵膜破裂。所以一般每天早晨7时左右收集1次，或是在傍晚再收集1次。

    收集方法是用80目筛绢网捞取集卵网箱中上浮的卵，然后放人水槽中，再用15～20目的窗纱网滤去亲鱼粪便等杂质，将受精卵放到孵化槽中孵化。另外也可采取将集卵网箱稍稍提起浓缩后将受精卵连同水舀入水桶中，用窗纱网滤去杂质后，将受精卵放到孵化槽中孵化。

    如果没有专门亲鱼产卵池，不能用溢流法来收集受精卵时，可用虹吸法。将虹吸管（一般为6.7～10厘米橡胶管），将其一端弯成钩状，口朝上，放在靠近水面以下，另一端放到集卵网箱中。随着池的水位降低将虹吸管钩状端下移，使漂浮于水面的受精卵吸出。最后到池水已很浅无法虹吸出时，可以池底排水口放水，将卵冲出。将收集到的受精卵放到0.5～1吨水槽中静置20～30分钟，将下沉的卵和亲鱼粪便等吸出，添加新水孵化。

    陆上水池培育的亲鱼，自然产卵起始水温为10.2～11.7℃，产卵期的水温一般为11～23℃。产卵盛期的水温为13～17℃，每年大体上是一致的。亲鱼的自然产卵时间大都在夜间，而70％左右是在0～6时这段时间。自然产卵水温要控制在℃以上、22℃以下。最适产卵水温控制在14～15℃。产卵池水的盐度要在1.9％以上。如果产卵池水的盐度在1.9％以下时，受精卵也会下沉。

    亲鱼在产卵前或在产卵期间，不要移动或受到惊动。如移动或受到惊动，不但会影响其产卵，而且产出的卵质量差（有的形成卵块）、不受精或受精差。亲鱼有时会因人影、躁音、振动而停止摄饵和产卵。所以亲鱼在产卵期要求周围环境光线暗淡，保持安静。

    牙鲆初期产的卵异常的比较多，而且产卵量少。所以集卵最好是在产卵开始5～7天后，在受精率、孵化率高的产卵盛期集卵。

（四）受用卵的运输     运送受精卵可用聚乙烯塑料袋（50厘米×70厘米），装入其容积60％～70％的经砂滤的洁净海水（盐度在1.9％以上，水温和产卵池水温相同）。如装海水15升，可放受精卵15～30万粒。也可用20升的聚乙烯塑料袋装水8～10升，放卵10万～20万粒卵。充氧后扎好口，放人泡沫塑料箱中。塑料袋周围放一些冰块或降温材料，将箱封好后用飞机或冷藏车运输。采用这种方法，当天产的卵经运输15～20小时没有什么问题。如果是产后l～2天的卵，运输途中而死亡，而且孵化出的仔鱼出现畸形的比例也比较高。另外还可以用帆布庄或水槽装其容积约2/3的水，将装在聚乙烯塑料袋中受精卵充氧后扎好口放在装好水的帆布篓或水槽中用卡车运输，遮光并防止运输途中水温升高。到达目的地后，立即将受精卵放在孵化槽中静置20～30分钟，吸出下沉的卵，调整水温，等待孵化。

（五）受精卵的计数       卵计数一般有两种方法，即容量法和重量法。      1.容量法计数    将收集的卵放在定量容积水槽中，加水到定量容积，充气搅匀后，用100毫升烧杯，在不同处随机取样3次，全量计数，然后推算出水槽中的卵数。计算出浮上卵数、下沉卵数，从而可计算出浮上卵率。计算公式为：

浮上卵率=（浮上卵数/总卵数）×100%

     2.重量法计数    用80目的筛绢网捞取卵，滤去水后秤量（牙鲆卵1克约为1300～1600粒）后进行计算。