让弧菌看的见，你怕了吗？？？

弧菌基础知识介绍

对虾养殖中常见弧菌种类


池塘弧菌的检测方法
目前，对于池塘弧菌的培养分离主要是通过TCBS培养基。全称为硫代硫酸盐-柠檬酸-胆汁酸盐琼脂培养基（Thiosulfate-citrate-bile salts agar），是分离、纯化各种弧菌的理想培养基。TCBS培养基根据不同弧菌菌落显色原理，所培养的弧菌菌落颜色就代表不同种类的弧菌，见表1。
致病机理：病原弧菌首先通过菌毛远距离黏附于感染部位的细胞，并在荚膜、外膜蛋白近距离黏附的协同作用下进一步增强其黏附力：病原弧菌在感染部位局部增殖，此时蛋白酶可降解黏附部位的蛋白质及细胞外基质ECM，这样不仅可以为病原弧菌提供必需的营养，造成感染部位的组织损伤，如皮肤溃疡及肠炎等，而且还有利于病原弧菌突破宿主的防线并在体内广为扩散。此外，蛋白酶还可以激活机体的血管舒张素一激肽级联机制，以增加感染部位的血管通透性，导致血液的渗出，从而引起感染部位的水肿及出血。毒力很强的病原弧菌，可从感染部位扩散至全身组织器官，并随血流扩散到肝、脾、肾等靶器官后，进行大量的增殖。
具体操作方法：
1、取水样：专用采水器取底部水样儿。
2、接菌种：打开培养皿盖子，用一次性滴管吸取水样至刻度后滴加到培养基中央，用一次性L涂菌棒将水样均匀涂在培养基表面至刚刚干（将涂菌棒顺时钟轻轻刮动，同时将培养皿逆时钟转动转动数圈即可）；盖上盖子，倒置在室内背光处（室温控制在25-30℃）。
3.数菌落数：室温培养（室温25~37℃培养1天，20~25℃培养1.5天）后取出培养皿，可见平板上出现颜色和直径有区别的菌落（直径1mm大小的菌落属于杂菌，不用点数）。数菌落数乘以10，得出每1毫升该养殖水体（水样）所含的弧菌数量。
4.检测指标：在对虾养殖水体生长的四种弧菌中，以副溶血弧菌的危害最大。副溶血弧菌大量繁殖并产生菌毒素致对虾中毒和肝胰脏萎缩呈现空肠空胃偷死症。一般养殖水体中副溶血弧菌数量超过300株/毫升（即在培养基平板上看到直径3-5mm的蓝绿色菌落数量超过30个），养殖对虾就会出现趴边、空肠空胃、肝胰脏萎缩等症状。副溶血弧菌呈蓝绿色，直径3-5毫米；溶藻弧菌黄色，直径3-5毫米。其他的直径不足1毫米的不用点数，属于杂菌。
数出的菌落数要乘以10，得出1毫升水样中的弧菌总数，如果超过1000个说明问题很严重了，最好控制在500个以下。根据我们的研究得出，弧菌总数500个/ml到1000个/ml,只需要2到3天的时能间，所以我们控制最好是弧菌菌落数在500个/ml 以下或是更低时进行，这样才能有效的预防对虾偷死病。我们建议在对虾养殖过程每5-7天检测一次弧菌数，因为我们要做长期跟综，根据弧菌数的变化量和多少做到提前防治。一般来讲当我们检测到虾池中 弧菌数在不太高的范围内通过一些治疗措施是可以做到控制的。对整个对虾养殖过程中，我们对几个虾池做了长期的跟踪检测，一般是做到5天一次检测弧菌，在七八月份3天检测一次，并且根据所检测到的弧菌数来提前采取一些措施防范。

图1  TCBS培养基

表1  TCBS培养基上常见弧菌菌落显色与对应的弧菌种类

弧菌的危害
对虾弧菌病是由弧菌属细菌性病原引起的，是目前对虾养殖过程中最为常见且危害最大的一类细菌性疾病。其表现的症状主要有红腿红尾、黄鳃、甲壳溃疡、肌肉白浊等，且常伴有细菌性败血症。在自然条件下，弧菌是一种条件致病菌，当环境条件恶化、对虾抵抗力降低时，弧菌就会乘虚而入。目前大量的科研数据以及市场一线数据均表明，对虾偷死、肠炎、生长缓慢、白便与弧菌存在极大的关系（图2）。而且国内外学者普遍认为副溶血弧菌（绿菌）为对虾养殖过程中的主要致病菌。据科研数据表明，当所测绿菌达弧菌总数1/3以上的塘，80%的虾塘会爆发疾病。


图2 常见弧菌感染引起的对虾问题

弧菌爆发规律简介
规律一：每次强降雨，转晴后弧菌一般会超标；
规律二：不良水体中绿菌滋生较多；
规律三：池塘返底、倒藻、转水等易爆发弧菌
弧菌防控思路
1.消毒（弧菌天敌）。定期消毒，在放苗的一星期后就开始使用一些蛭弧菌，而后可以配合一些碘制剂的消毒，包括高聚碘、蛋氨酸碘对弧菌的杀灭都有不错的作用。我们建议7到10天水体消毒一次（弧菌天敌），另外我们可以根据检测到的弧菌数的变化数做进一步的调整。
2.定期改底（全效底改片）。合理投喂   我们通过对养殖水中弧菌的垂直分布进行检测，结果说明：大部分弧菌都在池塘底部，附着在饲料、残饵、有机物、死藻上不断繁殖生长。对虾吃食这些物质后，通常引起一些胃肠道养病同，有时候当我们给发病池塘停料后，对虾发病程度减少。所以合理投喂，并且定期使用一些氧化分解性的底改，改善底质分解有机物为对虾提供一个好的生活环境。
3.定期肥水（乌金膏）  给水中定期补充一些微量元素、减少水中有机质的含量，控制养虾水体指标在一个正常水平，保持水体活度，弧菌喜欢有机质丰富的水体，所以后期更要注意水质的调控。
4.内服  我们知道一般来说弧菌都是些条件致病菌，它们在水里都是长期存在的，只是当养殖动物体质虚弱，或是水环境突然恶化时才会大面积爆发，所以前面几个方面我们都是从水环境方面进行改善。而养殖动物本身的营养需求也是比较重要的一方面。所们要求在对虾养殖过程中，全程使用肝胆泰乐+高稳维西+黄金多糖，喂五天停五天。通过改善肠道，保护肝脏，增强对虾体质，使养殖动物能更好的来抵御病害的侵袭。