牛血液相容性检查方法

养殖知识网发布时间：2016-08-16

1.玻璃管试验法

(1)分别从供体和受体颈静脉采血各5-10ml，分别置于贴有标签的试管内．静置分离血清，也可在试管中预先加入1份4%的枸橼酸钠，再加人9份血液，分离出血浆备用。

(2)把血清或血浆分别移至贴有标签的试管中备用。

(3)取各试管内的凝血块少许，分别置于含有生理盐水的试管内馄匀，使红细胞的颜色如蕃茄汁样。

(4)每组供体与受体牛的血样需用离心管两个，进行主要试验和次要试验。

主要试验管内先滴加受体牛血清1滴，然后加入供体牛红细胞悬液2滴；次要试验管内先加受体牛红细胞悬液1滴，再加入供体牛血清2滴。

(5)把试管置37℃水中5～8分钟，或置于室温30分钟。

(6)将试管以1000转份’的转速离心1分钟，取也试管振荡并仔细观察凝集反应。

阳性反应：试管内有明显红细胞凝集现象，出现凝血块，轻度振荡；

阴性反应：红细胞仅沉于管底，轻度振摇即可重新混浊。

2．玻片凝集试验法

(1)从供体牛采血1～2ml；用红细胞时，用生理盐水稀释10倍，用全血时，用生理盐水稀释5倍。

(2)从受体牛采血5～10ml，置室温下分离血清，或于试管内加入4%构橼酸钠溶液(9份血加1份4%的枸橼酸钠)。分离血浆。

(3)用吸管吸取受体牛血清或血浆于一张玻片上滴2滴，立即用另一吸管吸取供体牛血液混悬液或红细胞混悬液，加1滴于上述玻片上。

(4)使供体血与受体血混匀，置室温下10—15mm，观察凝集反应的结果。

阴性反应：即为相台血液，玻片上的液体均匀红染，无任何红细胞凝集现象。显微镜下观察，每个红细胞界限清楚。表明供体牛血可作输血之用。

阳性反应：玻片上的红细胞呈砂粒状凝块，液体透明，显微镜下红细胞彼此粘连在一起，分辨不清其界限。

3.判定凝集试验的注意事项

(1)假凝集红细胞呈絮状、均匀细砂粒状，可能因血浆中球蛋白和纤维蛋白原增高的缘故。鉴别时可滴人生理盐水，假凝集可散开，而真凝集仍成块状。

(2)冷凝集一般在。—5℃最明显，在玻片上易出现，对此先将血清与红细胞混悬液在35—37℃水中加温，再行操作。

(3)放置过久，水分蒸发，血清浓缩而红细胞凝集。

4.生物学试验在紧急情况下来不及作凝集试验时，可进行生物学试验。

方法是先对受体牛进行体温、呼吸、脉搏、黏膜色泽等检查，经颈静脉一次输入供体牛血200～300ml，10分钟后观察受体牛的反应，若上述指标无异常，说明供体和受体牛的血液是相合的，可继续进行输血。

若10分钟后受体牛出现不安，前肢刨地，呼吸和脉搏增效，黏膜发绀，肌肉震颤，胃肠蠕动亢进，频频排尿排便，垒身出汗时，说明血液不相合，应更换供体牛。生物学试验出现的输血反应一般经20—30分钟消失，通常不需处理。

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