霍乱弧菌O139感染(Vibrio Cholerae O139)

疾病名称  霍乱弧菌O139感染(Vibrio Cholerae O139)

概述   1993年3月《柳叶刀》杂志报道了在南亚的印度和孟加拉国多处暴发流行的一种感染性腹泻，其临床症状类似霍乱。经过研究，学者们指出该病的病原体属于霍乱弧菌，但既不是至今为止惟一被公认的引起霍乱的病原体O1群霍乱弧菌，又不同于以前的非O1群霍乱弧菌的138个血清型，而是一个未被认识的O139血清型，或称Bengal型。

O139菌株的出现，为霍乱弧菌的遗传学改变可能与现存的血清型被新血清型替代有关提供了一种见证，也由此对霍乱的流行病学提出了一个新的观点。与环境和宿主两大因素有关的遗传改变和自然选择可能极大地影响了不仅是印度和孟加拉等恒河三角洲地区，而且还有其他地方性和流行地区霍乱弧菌的遗传学、流行病学和进化。

病原学   1.生物学特性

(1)形态学  O139型霍乱弧菌在形态、培养及生化方面与O1群霍乱弧菌相似。该菌为革兰氏阴性弧菌，菌体短小呈弧形或逗点状，长2～3μm，宽0.5μm，菌体末端有一根鞭毛，呈穿梭样运动，不被O1群霍乱弧菌抗血清所阻止。O139型菌株经标准方法处理后，以带正电荷的铁蛋白染色，制成薄切片在电镜下观察，可以看到细菌周围包绕着比较薄、约20nm厚的高电子密度荚膜(此点与O1群不同)，荚膜物质提取纯化后，经高效阴离子交换色谱法和磁共振分析，证实为氨基糖。免疫电镜研究指出O139菌株的荚膜层为特异性抗原层并有增强致病性的作用。

(2)培养特性  刚分离到的O139型霍乱弧菌在含有牛胆酸、碲酸钠、动物胶、硫代硫酸钠、柠檬酸钠、胆盐、蔗糖、pH为8.2～8.4的TCBS培养基中生长，培养温度37℃，菌落呈黄色。

在TTG平板上呈浅灰色，不透明，菌落中心呈黑点。在L培养基上过夜培养后，原始划线菌落不透明，但传代培养后呈半透明菌落，O1群霍乱弧菌无此现象。此外，O139型霍乱弧菌不形成粗糙型菌落。也可以在含有0.3％盐类的培养基中生长，＞8％生长则停止。在营养琼脂、羊血琼脂等非选择培养基中，以及在对霍乱弧菌有选择性的含硫代硫酸盐一枸橼酸盐一胆盐一蔗糖琼脂及牛胆酸盐一亚碲酸盐一明胶琼脂(TTGA)中生长良好。在前者中形成典型的黄色菌落，在后者中形成具有黑色中心的灰白色菌落，四周有一不透明区包围和某些非O1群菌相似，在明胶琼脂及TTGA培养基中，该菌可形成半透明和不透明两种菌落。有些菌株形成其中一种菌落，另一些形成两者均有的混合型。由于明胶酶的活性，在含有明胶的培养基中，不透明菌株菌落周围有不透明区形成，而半透明的菌株很少有此特性。大约24h的长期培养，两种菌落的差异就变得不明显。一般认为不透明菌落具有荚膜而半透明的菌落不具有荚膜。O139型菌在碱性环境中生长旺盛，当pH＜5时，其生长受到抑制。

(3)生化特性  O139型菌对靛酚氧化酶反应阳性，能够分解多种糖类，不产气。像O1群一样，O139型菌发酵甘露糖和蔗糖，但不发酵阿拉伯糖，故属于Heiberg I群。O139型菌株的G+Cmol％为47.54％～48.51％，与O1群霍乱弧菌很近似。

(4)毒素  家兔肠段结扎动物模型实验证实O139型菌株产生霍乱毒素(CT)，产毒量为10.4～0ng/mL或更多，这与O1群霍乱弧菌的产毒量相仿。O139型菌株的产毒量多少与培养条件有关，37℃时在AKISW培养条件下较在LB培养基产毒量增100倍，这与埃尔托型霍乱弧菌一致。O139型霍乱弧菌在小鼠皮内注射的半数致死量为1.5×108。

(5)生存能力  O139型霍乱弧菌引起的霍乱流行期间，孟加拉国的Matlab、Dhaka、Bangla-desh等地区水样培养结果显示O139型霍乱弧菌阳性率为12％，霍乱毒素检出率为100％，而在O1群霍乱地方性流行地区，流行期间水样O1群霍乱弧菌培养阳性率＜1％，提示O139型菌株在水体中较O1群霍乱弧菌有较强的生存能力。

 2.抗原特性

(1)荚膜抗原  O139型菌株不像O1群霍乱弧菌，与大多数非O1群一样具有荚膜。此荚膜不同于LPS抗原，含有3，6-双脱氧己糖、氨基喹诺糖和少量十四烷酸与十六烷酸。荚膜的出现增强了O139剪型菌的毒力，能引起菌血症与抵御高效抗血清杀伤作用。荚膜在抗原识别中的作用可能是由于它遮住了关键性的表面抗原，使宿主的免疫应答降低，但用加热杀死的O139型全菌免疫家兔，获得的抗体可用ELISA法测定LPS及荚膜抗原。

(2)LPS抗原将从O139型菌中提取的LPS作SDS-PAGE电泳，然后用银剂染色，可以看到并无相当于光滑O1群菌的类脂A，核心寡聚糖和高分子量O抗原侧链的阶梯样图像，而是泳动稍慢于O1群菌的类脂A带和核心寡聚糖的双层图像。说明O139型菌的核心结构可能发生改变，缺少了高分子量O抗原侧链，取而代之的是低分子量的短链，这种LPS结构类似于半粗糙型的LPS，有人认为在弧菌科中首次发现了3，6-双脱氧己糖，也有人认为3，6-双脱氧已糖是荚膜多糖的一部分。在这种LPS中糖类有氨基喹诺糖、庚糖、葡萄糖，脂类有十四烷酸、十六烷酸、3-羟基十二烷酸与3-羟基十四烷酸。 1/4    1 2 3 4  尾页