诊治鸡病毒性关节炎的方法

　 诊治鸡病毒性关节炎的方法   概述一：
鸡病毒性关节炎又叫病毒性腱鞘炎，是由鸡呼肠孤病毒引起的足部关节肿胀、腱鞘发炎，继而使腓肠肌腱断裂的一种传染病，以肉鸡多发。
在急性发病鸡群，死亡、生长停滞、饲料利用率低、屠宰率下降及淘汰病鸡均为造成损失的重要原因。因此，本病对养禽业有重大的经济意义。
　　
概述二：
病毒性关节炎也称病毒性腱鞘炎，是由鸡呼肠弧病毒引起的一种传染病，以侵害关节滑膜、腱鞘、关节软骨和心肌为特征，多发生于肉鸡。本病仅发生于鸡，分布于美国、欧洲各国及日本，造成鸡群死亡、生长停滞、饮料利用率降低，给养鸡业造成重大损失。

二 病因　
鸡呼肠弧病毒与其他呼肠弧病毒相似，对外界环境抵抗力较强，但70％乙醇、0．5％的有机碘可使其灭活。

1病原特性
鸡病毒性关节炎的病原是呼肠孤病毒。病毒为无囊膜、呈20面体对称的双层结构。衣壳的直径约70—75纳米。病毒的基因组为可分段的双链RNA。在感染细胞的胞浆内呈晶格状排列。
病毒对乙醚不敏感，对pH3.0有抵抗力。对热稳定，能耐受60℃8—10小时，56C22～24小时，4C3年以上， —63度10年以上。2％来苏尔、3％福尔马林等有抵抗力，70％乙醇和0。5％有机碘可灭活病毒。
病毒可在鸡胚卵黄囊内或绒毛尿囊膜上以及2～6周龄鸡的原代鸡肾细胞培养物内生长。在感染的原代鸡肾细胞和鸡胚绒毛尿囊膜细胞内经常可看到呼肠孤病毒的特征性胞浆包涵体。在病变关节的滑膜细胞内尚未发现过包涵体。此外，病毒还可以在鸡胚肾细胞、肺细胞、成纤维细胞、幼龄地鼠肾细胞和鸭胚成纤维细胞中进行繁殖。含病毒的病料经卵黄接种鸡胚时，经5～7天出现鸡胚死亡，表现全身出血、胚体萎缩，肝肿大，脾肿大且有坏死灶；经尿囊膜接种时，可在尿囊膜上形成小的坏死斑。
本病毒的唯一宿主是鸡。
2．病料的采取
以无菌棉拭子由胫跗关节或胫股关节收集滑液，或将有水肿的滑膜用营养肉汤或细胞培养营养液制成10％悬液，也可取脾脏制备悬液，把处理好的病料放—20℃保存备用。
3．病原分离培养
(1)鸡胚接种 病毒能在发育鸡胚的卵黄囊内、绒毛尿囊膜上增殖，初次分离选用卵黄囊内接种。所用鸡胚应是SP，F胚或。来自无呼肠孤病毒感染的鸡群。将病料0．2毫升侮胚接种于5—7日龄鸡胚的卵黄囊内，35．5℃恒温孵化，鸡胚于接种后3～5天死亡，胚体出血，内脏器官充血或出血。存活胚发育不良，肝、脾、心脏肿大，并含有坏死灶。
鸡胚于绒毛尿囊膜接种后7—8天内死亡，在绒毛尿囊膜出现痘斑及产生胞浆包涵体。但鸡胚死亡率不稳定。
(2)细胞培养 呼肠孤病毒能在多种细胞(如原代鸡胚细胞、肾、肝、肺、巨噬细胞、绿猴肾、兔肾等细胞)上生长。以2～6周龄原代鸡肾细胞或肝细胞培养物为最合适。鸡肾细胞在接种病毒24～48小时后形成合胞体，脱落后形成多核巨细胞，在细胞单层上留下空斑。在感染细胞内可见到嗜酸性或嗜碱性胞浆包涵体。
(3)致病性检查 由于呼肠孤病毒普遍存在于禽体内，所以分离到病毒尚不能证明其就是临床疾病。还需测定病毒的致病性，方法是：应用上述分离的毒株给1日龄或2周龄易感雏鸡做足垫内接种，24～96小时后足垫肿胀，可蔓延到跗关节和跖上，逐渐出现跛行等症状，则表明分离物具有致病力。
(4)病毒的耐热性测定 将上述分离毒株置于60℃作用1、2、4小时，然后对鸡胚卵黄囊或2周龄雏鸡接种，如仍保留病毒活性，说明该分离毒株耐热。
必要时可以用已知鸡病毒性关节炎阳性血清对分离毒株做病毒中和试验或琼脂扩散试验鉴定。