池塘养殖镜鲤鲤春病毒血症病毒检出一例

四川省成都市蒲江县西来镇一镜鲤养殖池塘，面积4亩，平均水深1米，2台增氧机（见图1）。2015年5月份放镜鲤水花80万，后来卖了一部分鱼苗，剩下的留在塘中养成鱼。2016年4月中旬开始发病，发病时塘中镜鲤平均规格2.5斤/尾，水温约17℃。开始每天死亡1~2尾，随后死亡量逐渐上升，到4月底发病最严重时，每天死亡几百斤，整个池塘总共死鱼2000多斤。发病期间用过调水药和杀菌药，均无明显效果。进入5月份后，水温上升，死亡量开始下降。
        
5月15日到现场检查，测定水温20.9℃，水质指标：溶解氧5.07mg/L、pH值8.0、氨氮1.2 mg/L、亚硝酸盐0.05 mg/L。塘中有少量的鱼趴在浅水区，用网兜从塘中抓起一尾趴边的镜鲤，外观无明显病变（见图2）。解剖见鳃上粘液增多（见图3），镜检无寄生虫，但可见鳃上有血窦；肝脏肿大、出血（见图4），脾脏肿大、发黑（见图5）、肾脏肿大、出血（见图6），其它组织器官无明显异常。从病鱼的肝脏和肾脏中接种，脑心浸液培养基进行细菌分离，置于28℃下恒温培养。并取病鱼的鳃、肝脏、脾脏、肾脏分别用95%酒精和波恩氏固定液固定保存带回公司研究所做病毒检测和组织病理切片观察。
        
结果：经28℃培养48h无菌落长出（见图7）；病毒检测显示病鱼锦鲤疱疹病毒（Koi Herpesvirus，KHV）呈阴性，鲤春病毒血症病毒（Spring viremia of carp virus，SVCV）呈阳性（见图8）。将鲤春病毒血症病毒阳性目的条带进行测序比对，其序列与GenBank中鲤春病毒血症病毒基因序列同源性高达99.6%。组织病理切片观察显示：鳃小片间细胞增生致鳃丝呈棒状，轻微淤血（见图9）；肝脏空泡变性（见图10）；脾脏淤血，多含铁血黄素（见图11）；肾脏轻微淤血，肾间组织细胞零星散在坏死，可见多个红染质团，肾小球轻微萎缩（见图12）。
 
分析：1、本病例中鲤鱼在4月中旬开始发病，刚开始发病时水温17℃，在鲤春病毒血症病毒流行的水温范围；从发病鲤鱼症状上看，主要是内脏出血、淤血，与鲤春病毒病的症状相符，通过实验室RT-PCR检测鲤春病毒血症病毒成阳性，初步分析该病与鲤春病毒血症病毒感染有一定的关系。
        
2、据调查当地每年鲤鱼发病有两个高峰期，即4月中旬和9月末，死亡量大，药物不能控制，具有一定的传染性，是否与鲤春病毒血症病毒感染有关，有待进一步调查。（利洋公司研究所一室 雷燕 戚瑞荣  利洋水产药店西来店 朱伟提供 2016.08.04）
 

图1 养殖池塘基本情况

图2 从池塘中抓起的趴边鱼

图3 病鱼鳃上鲶鱼增多

图4 病鱼肝脏肿大、出血

图5 病鱼脾脏肿大、发黑

图6 病鱼脾脏肿大、出血

图7 病鱼的细菌分离结果

图8 病鱼病毒检测结果

图9 鳃小片间细胞增生致鳃丝呈棒状，轻微淤血

图10 肝脏空泡变性

图11 脾脏淤血，多含铁血黄素

图12 肾脏轻微淤血，肾间组织细胞零星散在坏死，肾小球轻微萎缩

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