合浦珠母贝人工授精技术
一、诱导产卵法的人工授精。 1.精卵的收集 当产卵盆中的亲贝出现产卵行为时,即把它们移入玻璃中继续产卵或排精,待亲贝排卵完毕,把卵子和精子分别集中到玻璃中。
2.人工授精 人工授精容器通常为1000-2000mL的玻璃缸,在授精之前预先在受精缸中放入容积为三分之一的海水,然后把珍珠贝精、卵分别经过20号筛绢过滤,倒入受精缸中,并立即用玻璃棒轻轻的搅动,使精、卵充分混和而进行受精作用。
3.换水和洗卵 在人工授精的过程中,由于有大量的精子混杂在受精缸中,时间一长会影响水质。所以人工授精之后要进行多次换水,以便把多余的精子排出去。换水是根据珍珠贝的受精卵,在卵裂时下沉的特性,采用缸吸分层换水法。即用虹吸管把受精缸中的离底10mm以上的海水换到外面,再加进新鲜的海水。然后进行第二次,第三次换水,每两次换水的时间间隔为60分钟。
4.胚胎的筛选 胚胎发育约经4小时,部分的胚胎发育到囊胚期,由于胚体纤毛的摆动,胚胎上浮成云雾状。同时又存在胚胎发育不一致的现象,优质受精卵发育的胚胎第一批上浮,次质的受精卵发育成的胚胎于第二、三批上浮。为了保证幼虫的质量,通常要在第一批胚胎上浮时,及时将其吸到胚胎培养桶中进行胚胎的培养,以供人工育苗使用。而第二、三批上浮的胚胎一般不作人工育苗使用。
5.胚胎的培养 珍珠贝的胚胎是在600,000mL的塑料桶中进行培养的,培养时先把300,000mL的胚胎放桶中,然后加入同体积的海水,同时还加入抗生素抑制细菌,经16-18小时胚胎发育到直线铰合幼虫,也叫“D”型幼虫,这个时期的培养叫做胚胎培养。
二、解剖法采卵的人工授精。解剖法所采配子需在化学药物如氨海水的激发下,才能进行授精。 1.采卵子、精子 切断闭壳肌,打开左壳,剪去外套膜、足丝、鳃等,用脱脂棉擦去生殖腺周围的粘液,分开雌、雄贝,雌贝生殖腺颜色为黄色,雄贝为桔红色。用吸管分别吸取生殖腺的卵子和精子,分别放在小烧杯中。
2.人工授精 (1)直接授精法 将精子和卵子按1:4的比例直接倒入氨海水中进行受精。氨海水的]浓度为40×10-5mol/L。
(2)改良的直接受精法 精卵混合在一起,放在氨海水中刺激5-6分钟,然后转到天然海水中进行受精,并于授精后一小时换水。
(3)间接受精法 精、卵分开各自在氨海水中刺激5-6分钟,然后把它们转到天然海水中进行受精,并于授精后一小时换水。 三、影响合浦珠母贝受精率高低的因素: 1.水温 受精和胚胎发育适温为25~30℃,最适水温27~29℃。
2.盐度 适宜盐度为20.00-24.00。
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